接種

1. ソルガムとホワイトクローバー種子を表面殺菌（5%次亜塩素酸ナトリウムで30分間）し、滅菌i-wipeを敷いたシャーレ上に置床する。
2. 約1週間インキュベーター内で発芽させる。
3. 未耕地黒ボク土：川砂：クレハ培土（5:4:1）を100℃で60分オートクレーブする。（土壌のpHを6付近にするため石灰散布）
4. 1/10000ワグネルポットに滅菌土を充てんする。
5. あらかじめ分離しておいた胞子をスポイトを用いて接種する。
6. ソルガム1本とホワイトクローバー3本を移植し、Sun bagに入れる。

 

栽培

1. メタルハライドランプ下で約4か月間栽培する。
2. 適時散水する。
3. 一部根を掘り出し感染率を確認する。
4. 十分感染していれば散水をやめ、枯死させる。

 

胞子確認

1. 約1-2ヶ月後に土壌中の胞子数を計数する。
2. 胞子のプレパラートを作成し保証試料とする、記録（種、株、日付、胞子数、継代番号等）ともに保管する。写真も撮っておく。
3. 胞子を含む土壌を冷蔵保存する。

 

参照URL

微生物遺伝資源利用マニュアル No.9 継代培養によるアーバスキュラー菌根菌の保存